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| Les glandes salivaires des larves de chironome («
ver de vase »), comme celles des larves
de drosophile, possèdent des cellules dotées de chromosomes
géants que l'on peut observer au microscope (voir la page
sur les chromosomes géants de larve de drosophile pour une introduction
générale). |
Voir aussi
: Réalisation de préparations microscopiques de glandes salivaires
de larve de drosophile
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Le chironome
(Chironomus sp)
| Les chironomes sont des insectes diptères voisins des tipules
et des moustiques, mesurant environ 10 mm de long et vivant à proximité
des plans d'eau et des rivières. Des éclosions quasi synchrones
donnent naissance à des nuées de ces moucherons adultes qui
volent groupés à la surface ou à proximité
de l'eau. Contrairement aux moustiques, les chironomes ne piquent pas.
Les mâles possèdent des antennes plumeuses. |
Chironome adulte
(taille réelle : 10 mm)
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Les larves, appelées improprement "vers de vase", sont
de couleur rouge : l'hémolymphe contient de l'hémoglobine
qui leur permet de supporter les faibles concentrations en oxygène
au fond des eaux où elles vivent. Les larves de chironome peuvent
former de véritables tapis au fond des plans d'eau. Beaucoup d'espèces
vivent dans des tubes enfouis dans la vase dont les larves émergent
pour capturer les particules en suspension. Elles possèdent des
filaments branchiaux abdominaux et font circuler l'eau par les mouvements
de leur corps. Les nymphes restent au fond des tubes jusqu'à l'éclosion
ou sont libres.
Il existe une grande variété d'espèces présentant
divers modes de vie et peuplant des milieux variés. |
Deux larves de chironome
(taille réelle : 10 mm)
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Anatomie de la larve de chironome
La technique de prélèvement des glandes salivaires est comparable
à celle pratiquée sur les
larves de drosophile. Il s'agit de séparer la tête du
reste du corps de telle sorte que les glandes salivaires soient entraînées
avec la tête. |
| Protocole |
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Saisir la tête avec des pinces fines.
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Maintenir en même temps le reste du corps vers le tiers antérieur
avec une autre pince.
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Arracher doucement la tête.
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Eliminer de la lame les restes de la partie postérieure du corps
et les débris éventuels.
Il reste alors sur la lame les glandes salivaires attachées
à la tête. Elles ont la forme de deux petites masses arrondies
reliées au tube digestif par un canal.
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Recouvrir l'échantillon d'une goutte de colorant et laisser agir
5 à 10 minutes.
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Recouvrir d'une lamelle.
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Appuyer légèrement sur la lamelle avec une pince tenue à
l'envers pour étaler au mieux les tissus.
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Pour tous les clichés présentés
:
Préparations extemporanées.
Coloration par l'orcéine acétique.
Photographies numériques.
NB Le bleu de toluidine et le vert de méthyle donnent également
de bons résultats.
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Repérer au faible grossissement du microscope l'échantillon
sur la lame et le parcourir pour identifier les grandes cellules des glandes
salivaires dont les chromosomes sont rendus bien visibles par l'orcéine.
Sur le cliché ci-contre, noter les cellules séparées
par l'étalement.
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Cellules de glande salivaire (x 100)
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Cellule de glande salivaire (x 250)
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Cellule de glande salivaire (x 400)
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Noter la présence de 4 chromosomes et l'alternance de bandes
sombres et claires sur les chromosomes |
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Gros plan sur les chromosomes (noyau x 1000, objectif à immersion)
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| Préparation du colorant |
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Orcéine acétique, solution stock
Dissoudre 1 g d’orcéine dans 45 mL d’acide acétique pur.
Faire bouillir jusqu’à dissolution et laisser refroidir.
Filtrer et conserver le filtrat au réfrigérateur.
Solution diluée à préparer extemporanément
Mélanger 9 mL de solution stock avec 11 mL d’eau distillée.
Fournisseurs |
Chironomes
Fournisseurs d'articles pour la pêche : les larves de chironomes
sont vendues sous le nom de vers de vase pour servir d'appât vivant. |
Vers de vase du commerce
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Orcéine
Référence O 7380
1 g : 13,60 € (tarif 2002)
SIGMA
L’Isle d’Abeau Chesnes, BP 701 38297 Saint Quentin Fallavier Cedex
Tel : 0474822800 |