Fiche technique
Utilisation des osazones pour la caractérisation des sucres réducteurs



  • Préparation


Préparer une solution de chacun des sucres réducteurs disponibles (10 g/L). Les sucres suivants donnent des osazones différentes : ribose, glucose, galactose, mannose, maltose, lactose. Le fructose ne peut être distingué du glucose.

    • Verser 5 mL de chaque solution dans des tubes à essai et ajouter 5 mL de réactif à la phénylhydrazine.
    • Placer les tubes au bain-marie à 80°C jusqu’à apparition d’un trouble ou d’une coloration jaune.
    • Laisser refroidir lentement (éteindre le bain marie) : un précipité jaune apparaît formé de cristaux d’osazones.

Divers précipités réalisés avec le maltose, le galactose, le glucose, le lactose, le mannose, le désoxyribose.

Seuls les sucres réducteurs donnent une osazone. Les solutions de sucres mélangées avec le réactif à la phénylhydrazine à chaud précipitent. Les cristaux ne sont visibles qu'au microscope.

  • Résultats

Les cristaux ont une forme spécifique des différents sucres réducteurs et permettent donc d’en faire la détermination qualitative de façon spécifique.

Une goutte de précipité est placé sur une lame porte-objet et recouverte d'une lamelle. La préparation est observée au grossissement moyen du microscope.

Glucosazone (x 250)

Maltosazone (x 250)

Galactosazone (x 160)

 Lactosazone (x 250)
Cristaux d'osazones photographiés au microscope optique

Pour les TP, on peut envisager diverses possibilités : soit préparer à l’avance des lames de référence avec les différentes osazones, soit laisser préparer par les élèves les différentes osazones possibles. Dans les deux cas, l’examen au microscope des osazones formées avec les produits cherchés et leur comparaison avec les osazones connues permettra de déterminer la nature des sucres présents dans la solution.

  • Réactif à la phénylhydrazine
 
  • Phénylhydrazine........................5 mL
  • Acide acétique...........................5 mL
  • Eau distillée..............................40 mL

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