La mitose ou division cellulaire est un mode de reproduction
asexuée des cellules eucaryotes permettant leur
multiplication. Elle conduit, à partir d'une cellule
mère, à la formation de deux cellules filles identiques
génétiquement, entre elles et avec la cellule
mère, car au cours de ce processus, les chromosomes de la
cellule mère sont dupliqués et répartis
également entre les cellules filles. Chez les organismes
pluricellulaires, c'est le principal facteur responsable de la
croissance des tissus.
Pour observer aisément les différentes phases de la
mitose et les chromosomes,
il est préférable d'utiliser de jeunes organes en
croissance dans lesquels les mitoses sont nombreuses. En outre, les
cellules végétales étant
généralement plus grosses que les cellules animales et
donc plus faciles à observer au microscope et l'utilisation
d'organes végétaux ne soulevant pas de problèmes
éthiques, il est aussi préférable d'utiliser des
organes végétaux. Un matériel biologique
particulièrement adapté, facile à obtenir et peu
coûteux est constitué
par les jeunes racines obtenues à la base de bulbes de diverses
plantes (ail, oignon, échalote, jacinthe).
Pour obtenir le développement des racines en quelques jours
(généralement 2 à 5 jours), il suffit de placer
les
bulbes quelques jours avant la manipulation sur un récipient
rempli d'eau de façon à ce que le plateau du bulbe (sa
base)
baigne dans l'eau. Pour maintenir un niveau d'eau suffisant en
dépit de l'évaporation, il suffit de rajouter
chaque jour un peu d'eau dans les flacons.
La photographie ci-dessous montre le résultat obtenu en quelques
jours pour différents bulbes.
La croissance des racines est rapide, de l'ordre de quelques mm par
jour. Elle résulte
des mitoses qui se produisent dans le méristème
racinaire, zone de croissance
située dans la zone sub-apicale de la racine.
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Bulbes d'oignon, d'ail et d'échalottes
après croissance des racines
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Le méristème
forme une petite tâche visible à l’œil nu, proche de
l'extrémité des racines, comme on le voit
dans le cliché ci-dessous. C'est la région qu'il convient
de prélever pour réaliser la préparation.
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L'identification des figures de mitose nécessite d'explorer
soigneusement
l'ensemble de la préparation car les cellules sont
dissociées
à la suite des traitements subis et le nombre de cellules en
division par rapport au nombre total de cellules est faible.
Les clichés ci-dessous ont été
réalisés
avec un grossissement du microscope x 400 et un zoom numérique x
2. Ils présentent dans l'ordre chronologique du
déroulement les phases caractéristiques de la mitose,
prophase, métaphase, anaphase, télophase. La plupart des
clichés montrent aussi des cellules en interphase.
Interphase (en bas) et prophases
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Interphase (à gauche) et métaphase
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Anaphase (à gauche) et interphase
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Télophase
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Acide chlorhydrique 1 mol.L-1
Dans une fiole jaugée de 1 L, verser 914 mL
d’eau distillée.
Compléter à 1 L avec de l’acide chlorhydrique
à 36
% (densité 1,178). |
Orcéine acétique,
solution mère
Dissoudre 1 g d’orcéine dans 45 mL
d’acide acétique pur.
Faire bouillir jusqu’à dissolution et laisser refroidir.
Filtrer et conserver le filtrat au réfrigérateur. |
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Solution diluée à
préparer extemporanément
Mélanger 9 mL de solution mère avec 11 mL
d’eau distillée
et répartir dans des flacons compte-gouttes. |
Orcéine :
SIGMA
L’Isle d’Abeau Chesnes, BP 701 38297 Saint Quentin Fallavier
Cedex
Téléphone : 04 74 82 28 00
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