Protocole

 Isolement de colonies de microorganismes sur milieu gélosé



  • Protocole

1- Préparer une boîte de culture de milieu complet à proximité du bec Bunsen ainsi que la boîte ou le tube contenant l’échantillon à prélever.

2- Passer l'anse à la flamme, la laisser refroidir et avec l'autre main entrouvrir la boîte de culture ou ouvrir le tube.

3- Prélever une colonie ou une goutte de suspension avec l'anse, refermer la boîte ou le tube et prendre la boîte vierge.

4- Diviser mentalement la boîte en secteurs égaux ou s’aider d’une matrice placée sous la boîte et déposer l'échantillon en laissant traîner l'extrémité de l'anse en zig zag dans le premier secteur de la périphérie vers le centre de la boîte.

5- Repasser l'anse à la flamme, la laisser refroidir, faire tourner la boîte d'un secteur et repasser avec l'anse dans la partie supérieure du dépôt initial qu'on étalera dans le deuxième secteur comme précédemment sans croiser de nouveau le premier dépôt.

6- Procéder de la même façon pour les autres secteurs de la boîte.

Succession des mouvements de
l'anse à la surface du milieu de culture

Ne pas oublier de repasser l'anse à la flamme et de la laisser refroidir avant de faire tourner la boîte d'un secteur et d'y passer l'anse

7- Placer la boîte à l'étuve (25 à 30°C), posée à l'envers c'est à dire sur le couvercle.

  • Résultats

Après 48 heures d'incubation, des colonies isolées sont visibles dans les derniers secteurs ensemencés.

           
Voir des colonies
Cliquer sur les images ou sur les liens pour voir les résultats obtenus par un étalement en stries sur un milieu nutritif stérile
 

         
Bactéries Escherichia coli (Colibacille)
 

 
Bactéries Escherichia coli (autre culture)
Levures Saccharomyces cerevisiae (souche sauvage

Bactéries luminescentes Photobacterium phosphoreum

Bactéries luminescentes Vibrio harveyi


Archéobactéries Halobacterium salinarum

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Didier Pol © 2006 
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