Fiche technique

TYROSINASE

La tyrosinase est une phénol oxydase qui catalyse l’oxydation par le dioxygène de nombreux substrats phénoliques comme la tyrosine ou le dihydroxybenzène (pyrocatéchol) selon l’équation-bilan :

Tyrosinase

Dihydroxybenzène (incolore) + ½ O2 -------------------->  benzoquinone (colorée) + H2O

Cette enzyme intervient chez les animaux dans les voies de biosynthèse de certains neurotransmetteurs, hormones et pigments (mélanines). Chez les végétaux elle est responsable du brunissement des fruits et légumes à l’air.

Le pyrocatéchol incolore se transforme par oxydation en un dérivé rose. Cette propriété rend possible l’étude de la cinétique enzymatique par spectrophotométrie.

Solutions

dihydroxybenzène à 5 mmol.L-1, solution stock d’enzyme à 1 mg.mL-1

Protocole

3 mL de solution de dihydroxybenzène sont placés dans la cuve après agitation forte (saturation en dioxygène dissous) pour le réglage du zéro d’absorption. Au
temps To, l’acquisition est déclenchée immédiatement après l’injection de 0.5 mL de solution d’enzyme dans la cuve à travers l’orifice ménagé dans le couvercle.

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