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 Extraction de l’ADN d'oignon
  • Protocole
•    Découper le matériel biologique en petits morceaux d’environ 5 mm de côté.
•    Verser les morceaux dans un flacon contenant 100 mL de tampon d’extraction.
•    Placer le flacon au bain Marie à 60 °C pendant 15 minutes.
•    Transférer le flacon dans la glace pendant 5 minutes et remuer de temps en temps avec un agitateur.
•    Verser le mélange dans le broyeur électrique et broyer avec quelques courtes impulsions.
•    Filtrer avec un filtre à café ou centrifuger et verser 20 mL du filtrat ou du surnageant dans un bécher.
•    Ajouter la protéase et mélanger. Laisser incuber pendant 5 minutes.
•    Verser lentement 20 mL d’éthanol glacé le long du bord du bécher de façon à ce qu’il forme une couche au dessus du filtrat et attendre quelques minutes.
•    Récupérer l’ADN qui a précipité à l’interface avec une pipette.
Si l’on veut utiliser l’ADN pour une électrophorèse, récupérer l’ADN dans un tube Eppendorf contenant 1 mL d’éthanol absolu. Le centrifuger et éliminer le surnageant. Sécher le culot complètement pour éliminer l’alcool et dissoudre l’ADN dans du tampon TE.

  • Tampon d’extraction
NaCl : 3 g
Liquide vaisselle ou SDS 10 % : 10 mL
Eau distillée : 100 mL

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