Les cultures sont conduites sur milieu liquide ou solide. Pour le milieu
liquide, utiliser des flacons stériles bouchés par un tampon
de gaze permettant la circulation de l'air ; pour le milieu solide, couler
le milieu dans des boîtes de Pétri.
Les cultures doivent être exposées à la lumière
(tube fluorescent d'horticulture ou devant une fenêtre) mais il faut
éviter la lumière directe du Soleil.
Les cultures peuvent être menées à la température
du laboratoire (autour de 20°C).
Pour la conservation à long terme, repiquer les souches tous les
3 à 6 mois.
Milieux de culture (stériliser
à l'autoclave pendant 20 min à 120°C)
Milieu d'usage généralpour algues vertes unicellulaires
(Bold, 1967)
Solutions stocks (pour chaque solution stock, masse à dissoudre
dans un litre d'eau distillée)
1. NaNO3 : 25 g
2. CaCl2, 2H2O : 2,5 g
3. K2HPO4 : 7,5 g
4. KH2PO4 : 17,5 g
5. MgSO4, 7H2O : 7,5 g
6. NaCl : 2,5 g
7. EDTA
Dissoudre 50 g d'acide éthylène-diamine-tétra-acétique
et 31 g de potasse (KOH) dans un litre d'eau distillée
8. Solution de fer
Dissoudre 4,98 g de sulfate de fer heptahydrate (FeSO4,
7H2O) dans un litre d'eau acidifiée préparée
en ajoutant 1 mL d'acide sulfurique à 999 mL d'eau distillée.
9. Solution de bore
Dissoudre 11,42 g d'acide borique (H3BO3) dans
un litre d'eau distillée.
10. Microéléments
Dissoudre les sels suivants dans un litre d'eau acidifiée
:
ZnSO4, 7H2O : 8,82 g
MnCl2, 4 H2O : 1,44 g
MoO3 : 0,71 g
CuSO4, 5H2O : 1,57 g
Co(NO3)2, 6H2O : 0,49 g
Pour préparer un litre de milieu de culture à partir des
10 solutions stocks préparées à l'avance, mélanger
10 mL de chacune des solutions 1 à 6, 1 mL de chacune des solutions
7 à 10 et compléter à un litre avec de l'eau distillée.