Fiche technique

Simulation de la détermination de l'activité de la tyrosinase dans le cadre du diagnostic prénatal



  1. Marquer cinq étiquettes de la façon suivante : mère, père, fille albinos, garçon normal, foetus.
  2. Coller chaque étiquette sur un tube à hémolyse et placer les tubes dans le portoir.
  3. Répartir 1 mL de solution de substrat dans chaque tube avec une pipette graduée.
  4. Agiter chaque tube pour l'oxygéner.
  5. Ajouter dans chaque tube 0,5 mL de l'extrait enzymatique à tester.
  6. Agiter en retournant quatre ou cinq fois le tube.
  7. Au bout de 15 minutes, observer la coloration de chaque test ou mesurer l'absorbance au spectrophotomètre.



  8. Il s'agit d'une simulation pour des objectifs pédagogiques. C'est pourquoi, les "extraits enzymatiques" à tester sont en fait réalisés avec un extrait de champignon. (consulter la technique d'extraction de la tyrosinase du champignon de Paris)
    Ils sont ensuite préparés à l'avance de la façon suivante :

    Mère : extrait enzymatique dilué au 1/4.
    Père : extrait enzymatique dilué au 1/4.
    Fille albinos : eau distillée
    Garçon normal : extrait enzymatique non dilué
    Foetus : eau distillée

    La solution de substrat peut être du pyrocatéchol à 0,55 mmol/L ou une solution de tyrosine à saturation.

TOUS DROITS RÉSERVÉS
Didier Pol © 2006 
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