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Fiche technique
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Simulation de la détermination
de l'activité de la tyrosinase dans le cadre du diagnostic prénatal
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Marquer cinq étiquettes de la façon suivante : mère,
père, fille albinos, garçon normal, foetus.
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Coller chaque étiquette sur un tube à hémolyse et
placer les tubes dans le portoir.
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Répartir 1 mL de solution de substrat dans chaque tube avec une
pipette graduée.
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Agiter chaque tube pour l'oxygéner.
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Ajouter dans chaque tube 0,5 mL de l'extrait enzymatique à tester.
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Agiter en retournant quatre ou cinq fois le tube.
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Au bout de 15 minutes, observer la coloration de chaque test ou mesurer
l'absorbance au spectrophotomètre.
Il s'agit d'une simulation pour des objectifs pédagogiques.
C'est pourquoi, les "extraits enzymatiques" à tester sont en fait
réalisés avec un extrait de champignon. (consulter
la technique d'extraction de la tyrosinase du champignon de Paris)
Ils sont ensuite préparés à l'avance
de la façon suivante :Mère : extrait enzymatique dilué au 1/4.
Père : extrait enzymatique dilué au 1/4.
Fille albinos : eau distillée
Garçon normal : extrait enzymatique non dilué
Foetus : eau distillée
La solution de substrat peut être du pyrocatéchol à
0,55 mmol/L ou une solution de tyrosine à saturation.
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