ENZYMOLOGIE : deuxième
séance MESURE DE LA VITESSE DE REACTION
ET EFFET DE LA CONCENTRATION EN SUBSTRAT SUR LA VITESSE DE REACTION
Résultats
élèves (Graphiques obtenus par
ExAO)
Cliquer sur les graphiques
pour obtenir des images de plus grandes dimensions.
Les mesures sont réalisées en % de transmission pour les
différentes dilutions en peroxyde d'hydrogène. La figure
1 présente les résultats obtenus.
Figure 1 : superposition des cinétiques obtenues pour diverses
concentration en substrat (peroxyde).
Les données sont converties en absorbance puis les vitesses initiales
sont calculées pour les différentes concentrations en substrat.
Un affichage des tracés superposés permet les premières
constatations sur les relations entre concentration en substrat et vitesse
initiale (figure 2).
Figure 2 : superposition des cinétiques et tangentes donnant
la vitesse initiale
Les vitesses initiales calculées sont utilisées pour construire
un graphe secondaire qui permettra de déterminer les constantes
cinétiques (figure 3).
Figure 3 : vitesse initiale en fonction de la concentration en substrat
Les points expérimentaux correspondent à une cinétique
michaelienne dont on détermine les constantes Vmax et Km. On a ici
superposé en outre la modélisation de l’équation de
Michaelis-Menten. Bien que cette notion ne soit pas au programme, il est
intéressant de donner le principe d’une modélisation. Aucun
développement n’est fait sur l’équation elle-même qui
est présentée (sans démonstration) pour ses relations
avec les constantes déterminées expérimentalement.