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 Caractérisation de constituants chimiques de l’ADN
 


  • Hydrolyse de l’ADN
•    Mélanger l’ADN en solution avec un volume dix fois plus grand d’acide perchlorique 0,5 N dans un petit ballon à fond plat.
•    Placer le ballon au bain marie bouillant pendant 15 minutes.
•    Faire les tests directement sur la solution.
  • Désoxyribose
•    Mélanger 1 mL de l’hydrolysat avec 5 mL de réactif à la diphénylamine dans un tube à essai.
•    Placer au bain marie bouillant pendant 10 à 15 min.
Une coloration bleue apparaît (contrôle : solution de désoxyribose)
  • Phosphate
•    Mélanger 2 mL d’hydrolysat avec 1 mL de réactif nitromolybdique dans un tube à essai.
•    Chauffer quelques minutes au bain marie
Un précipité jaune apparaît (contrôle : solution de phosphate)
  • Solutions
Acide perchlorique 0,5 N

1 volume d’acide perchlorique + 1 volume d’eau distillée
Réactif nitromolybdique

Molybdate d’ammonium : 15 g
Acide nitrique (d = 1,4048) : 15 mL
Acide sulfurique (d = 1,8837) : 5 mL
Eau distillée : 100 mL
Réactif à la diphénylamine

Diphénylamine : 0,8 g
Acide acétique : 80 mL
Acide sulfurique : 2,2 mL
Réactif des phosphates (à froid)

Molybdate d’ammonium : 1 g
Acide sulfurique à 0,5 mol.L-1 : 100 mL
Sulfate de fer : 4 g

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