Mettre en suspension, en conditions stériles, une colonie de
Schizosaccharomyces pombe de phénotype sauvage dans 5 mL de milieu YE et agiter
vigoureusement, éventuellement au vortex, pour séparer les
cellules et oxygéner le milieu.
Observer une goutte de la suspension au microscope aux différents
grossissements et photographier ou dessiner quelques cellules représentatives
de l’ensemble.
Déterminer leur taille (sachant que les
traits de la grille des lames de numération mesurent 15 µm
d'épaisseur).
Identifier des cellules en division (paroi transversale) et évaluer
leur proportion dans l’échantillon.
Après 24 h d’incubation remettre les cellules en suspension en
agitant au vortex.
Refaire une numération.
Les caractéristiques de la population ont elles changé
? (croissance éventuelle de la population, taille des cellules,
proportion de cellules en division).
Le cycle cellulaire de S. pombe
Comme chez tous les eucaryotes, le cycle cellulaire de S. pombe
alterne interphase et mitose. L’interphase comporte la succession de phases
appelées G1, S et G2 et la mitose ou phase M comporte la succession
prophase, métaphase, anaphase, télophase.
Toutefois, le cycle cellulaire de S. pombe comporte quelques
particularités. Contrairement à la levure de bière,
S. pombe n’est pas une levure bourgeonnante mais une levure fissipare.
Lors de la mitose, les deux cellules filles se séparent à
la suite de la formation d’une paroi transversale dans la cellule mère.
En outre, la phase G1 est particulièrement courte et, contrairement
à la plupart des cellules eucaryotes, l’enveloppe nucléaire
ne disparaît pas au cours de la division. Enfin, une fois les
noyaux séparés, la paroi transversale se forme alors que
les deux cellules filles sont passées brièvement en G1 et
commencent la phase S, c’est à dire la réplication de l’ADN.
Un des avantages de cette levure est que chaque phase du cycle cellulaire
correspond à une taille déterminée des cellules qui
permet de l’identifier. Puisque la succession des phases du cycle cellulaire
et la taille des cellules aux différentes étapes se transmettent
de génération en génération, c’est qu’il s’agit
de caractères héréditaires dont on sait qu’ils sont
gouvernés par des gènes.
Identifier des cellules aux différentes étapes du
cycle cellulaire en les mesurant au microscope. Le cas échéant,
prendre un cliché numérique d’une préparation et réaliser
les mesures avec un logiciel de dessin.
Représenter graphiquement les variations de la quantité
d'ADN des cellules au cours du cycle.
