| FICHE
TECHNIQUE
RESPIRATION ET FERMENTATION CHEZ
LA LEVURE
Protocole respiration
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Placer 4.5 mL de tampon dans la cuve de mesure.
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Prélever 0.5 mL de suspension de levures et les ajouter dans la
cuve.
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Agiter énergiquement la cuve pour saturer le milieu en oxygène
moléculaire.
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Étalonner la sonde à oxygène.
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Paramétrer l'acquisition pour une mesure de 3 minutes sur la voie
EA2.
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Démarrer l'acquisition et après 30 secondes, injecter lentement
0.2 mL de solution de glucose.
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Sauver les résultats et imprimer le graphique.
Protocole fermentation
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Paramétrer l’acquisition pour une mesure de 15 min sur la voie EA0.
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Placer 8 mL de la suspension de levures non diluée dans le flacon
de mesure.
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Ajouter 4 mL de solution de glucose et agiter légèrement
pour mélanger.
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Mettre en place le capteur sur le flacon et placer ce dernier au bain-marie.
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Déclencher la mesure.
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Sauver les résultats et imprimer le graphique.
Numération des cellules
Pendant les temps d'acquisition, prélever 10 µL de la suspension
mère de levures, la diluer au 1/100 et introduire une goutte de
la dilution dans une cellule de numération.
Compter les cellules dans un carré de la grille.
Multiplier le résultat par 90 pour obtenir le nombre de cellules
par µL.
Multiplier le nombre obtenu par 100 pour tenir compte de la dilution
réalisée : la valeur finale est le nombre de cellules par
µL dans la suspension mère.
En déduire le nombre de cellules présentes respectivement
dans les cuves utilisées pour les mesures de fermentation et de
respiration.
Conserver les résultats pour la prochaine séance.
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