FICHE TECHNIQUE

RESPIRATION ET FERMENTATION CHEZ LA LEVURE

Protocole respiration

  1. Placer 4.5 mL de tampon dans la cuve de mesure.
  2. Prélever 0.5 mL de suspension de levures et les ajouter dans la cuve.
  3. Agiter énergiquement la cuve pour saturer le milieu en oxygène moléculaire.
  4. Étalonner la sonde à oxygène.
  5. Paramétrer l'acquisition pour une mesure de 3 minutes sur la voie EA2.
  6. Démarrer l'acquisition et après 30 secondes, injecter lentement 0.2 mL de solution de glucose.
  7. Sauver les résultats et imprimer le graphique.
Protocole fermentation
  1. Paramétrer l’acquisition pour une mesure de 15 min sur la voie EA0.
  2. Placer 8 mL de la suspension de levures non diluée dans le flacon de mesure.
  3. Ajouter 4 mL de solution de glucose et agiter légèrement pour mélanger.
  4. Mettre en place le capteur sur le flacon et placer ce dernier au bain-marie.
  5. Déclencher la mesure.
  6. Sauver les résultats et imprimer le graphique.
Numération des cellules

Pendant les temps d'acquisition, prélever 10 µL de la suspension mère de levures, la diluer au 1/100 et introduire une goutte de la dilution dans une cellule de numération.

Compter les cellules dans un carré de la grille.

Multiplier le résultat par 90 pour obtenir le nombre de cellules par µL.

Multiplier le nombre obtenu par 100 pour tenir compte de la dilution réalisée : la valeur finale est le nombre de cellules par µL dans la suspension mère.

En déduire le nombre de cellules présentes respectivement dans les cuves utilisées pour les mesures de fermentation et de respiration.

Conserver les résultats pour la prochaine séance.


Retour à la fiche de TP

TOUS DROITS RÉSERVÉS
Didier Pol © 2006 
dpol#noos.fr
Emplacements des visiteurs de cette page

N'hésitez pas à faire connaître vos impressions, commentaires, suggestions etc