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Détection de
sucres réducteurs
par la liqueur de Fehling
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- Principe
La liqueur de Fehling est une solution renfermant des
ions cuivre
II (Cu2+), de couleur bleue en milieu basique.
À chaud, en présence d’une substance réductrice,
la
liqueur de Fehling donne un précipité rouge d’oxyde de
cuivre
Cu2O
(cuivre I) selon l'équation ci-dessous (le groupe
aldéhyde -CHO est présent dans la forme linéaire
des sucres réducteurs).
Réaction d'oxydo-réduction entre le groupement aldéhyde et la liqueur de Fehling
La réaction n’est pas spécifique d'une substance
quelconque puisqu'elle détecte simplement des
propriétés réductrices. Elle est utilisée,
cependant, pour mettre en évidence la présence de sucres
réducteurs dans une solution. En effet, lorsque le milieu est
contrôlé, par exemple lorsque l'on étudie des
glucides (constitution de l'amidon, présence ou absence d'un
sucre supposé, etc.), l'apparition de propriétés
réductrices indique qu'un ou des sucres réducteurs (la
plupart des oses et divers diosides) sont apparus dans le milieu. Leur
nature ne peut cependant être inférée que si l'on
connaît la constitution chimique des molécules initiales.
Pour identifier précisément les différents sucres
réducteurs, on peut utiliser la formation d'osazones qui
cristallisent avec des formes spécifiques selon les sucres. Se
reporter à la page :
Utilisation des osazones pour
la caractérisation des sucres réducteurs
La
recherche des sucres réducteurs
avec la liqueur de Fehling doit être réalisée sur
une solution déprotéinisée car la réaction
est positive, même à froid, avec des protéines. On
peut éliminer les protéines d’une solution en la traitant
par l’acide
trichloroacétique et en éliminant le
précipité formé par centrifugation.
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- Protocole
Mélanger 0,5 mL de liqueur de Fehling avec 1 mL de solution
à tester dans un tube à essai en Pyrex et placer le tube
quelques minutes dans un bain marie bouillant ou le chauffer à
la
flamme d'un bec Bunsen.
En présence d’un sucre réducteur, il se forme un
précipité
rouge brique.
NB La solution à tester ne doit pas
être acide. Si
c’est le cas, alcaliniser le milieu au préalable avec de la
soude
et vérifier le pH.
Ne jamais diriger l'ouverture du tube à
essai vers une personne.
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Préparation de la liqueur de Fehling
- Solution
A (solution de sulfate de cuivre) : dissoudre 40 g de sulfate
de cuivre
(CuSO4) dans 900 mL d’eau
distillée et chauffer pour dissoudre le sel. Compléter
à 1 L.
- Solution B
(solution basique de tartrate double) : dissoudre 200 g de sel de
Seignette (tartrate double de sodium et de
potassium) et 150 g de
soude dans 1 L d’eau
distillée.
- Mélanger, au
moment de
l'emploi, des volumes égaux de ces deux solutions.
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