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TECHNIQUE
CINETIQUE ENZYMATIQUE EN FONCTION
DE LA TEMPERATURE
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Verser 2 mL de la solution d’enzyme dans 6 tubes à hémolyse
en verre et les boucher.
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Verser 3 mL de solution de substrat (gaïacol et peroxyde d’hydrogène)
dans 6 autres tubes et les boucher.
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Dans chaque bain thermostaté (O°C, 20°C, 40°C, 60°C,
80°C, 100°C), placer un tube d’enzyme et un tube de substrat et
laisser incuber 10 minutes.
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Pour chaque température étudiée, procéder de
la même façon : verser les 3 mL de substrat dans une cuvette
standard et placer la cuvette dans le colorimètre. Prélever
0.5 mL d’enzyme à la même température et l’injecter
dans la cuvette à travers le couvercle. Enregistrer pendant 3 minutes
et sauver le fichier avec un nom explicite.
Calculer la vitesse initiale obtenue pour chaque mesure et construire
le graphique Vi = f (température)
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