FICHE TECHNIQUE

CINETIQUE ENZYMATIQUE EN FONCTION DE LA TEMPERATURE


  1. Verser 2 mL de la solution d’enzyme dans 6 tubes à hémolyse en verre et les boucher.
  2. Verser 3 mL de solution de substrat (gaïacol et peroxyde d’hydrogène) dans 6 autres tubes et les boucher.
  3. Dans chaque bain thermostaté (O°C, 20°C, 40°C, 60°C, 80°C, 100°C), placer un tube d’enzyme et un tube de substrat et laisser incuber 10 minutes.
  4. Pour chaque température étudiée, procéder de la même façon : verser les 3 mL de substrat dans une cuvette standard et placer la cuvette dans le colorimètre. Prélever 0.5 mL d’enzyme à la même température et l’injecter dans la cuvette à travers le couvercle. Enregistrer pendant 3 minutes et sauver le fichier avec un nom explicite.
  5. Calculer la vitesse initiale obtenue pour chaque mesure et construire le graphique Vi = f (température)

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