Fiche technique
 |
Extraction et séparation des pigments des organismes chlorophylliens
|
Extraction (pigments apolaires)
-
Broyer l'échantillon avec un peu de sable et une pincée de
chlorure de calcium dans un mortier jusqu'à obtenir un mélange
homogène.
-
Ajouter 5 mL d'acétone et broyer de nouveau soigneusement.
-
Laisser décanter et récupérer le liquide dans un tube
en verre.
-
Ajouter 5 mL d'acétone et broyer de nouveau.
-
Verser le liquide dans un tube de centrifugeuse et ajouter la solution
obtenue au 3.
-
Centrifuger et récupérer le surnageant.
-
Réunir tous les extraits dans le même flacon, l'étiqueter
avec le nom de l'espèce et du solvant utilisés et le mettre
à l'abri de la lumière.
Extraction (pigments polaires)
-
Broyer l'échantillon avec un peu de sable et une pincée de
chlorure de calcium dans un mortier jusqu'à obtenir un mélange
homogène.
-
Ajouter 5 mL d'eau distillée et broyer de nouveau soigneusement.
-
Laisser décanter et récupérer le liquide dans un tube.
-
Ajouter 5 mL d'eau distillée et broyer de nouveau.
-
Verser le liquide dans un tube de centrifugeuse et ajouter la solution
obtenue au 3.
-
Centrifuger et récupérer le surnageant.
-
Réunir tous les extraits dans le même flacon, l'étiqueter
avec le nom de l'espèce et du solvant utilisés et le mettre
à l'abri de la lumière.
Séparation des pigments par chromatographie sur papier
-
Tirer un trait transversal avec un crayon à 1 cm du bord de la bande.
-
Ecraser une rondelle de feuille au centre du trait avec l'extrémité
d'un agitateur de verre et enlever les débris solides à la
pince.
-
Laisser sécher le dépôt en s'aidant éventuellement
d'un sèche-cheveux.
-
Recommencer les opérations 2 et 3 jusqu'à obtenir un dépôt
intensément coloré.
-
Placer la bande dans le flacon, le fermer hermétiquement et faire
coulisser le crochet de façon à ce que le bord de la bande
plonge dans le solvant à 1 cm au dessous du dépôt..
-
Laisser le chromatogramme se développer pendant 40 à 45 minutes.
Voir des résultats
Retour à la fiche de TP
|