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TECHNIQUE
CINETIQUE ENZYMATIQUE EN FONCTION
DU pH
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Verser 1 mL de la solution d’enzyme dans 6 tubes à hémolyse
numérotés de 1 à 6.
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Verser 3 mL de la solution de substrats (gaïacol et peroxyde d’hydrogène)
dans 6 autres tubes numérotés.
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Verser dans chaque tube d’enzyme 1 mL de tampon (pH 2, 4, 6, 8, 10, 12)
et 3 mL de tampon (pH 2, 4, 6, 8, 10, 12) dans les tubes contenant les
substrats. Laisser incuber 10 minutes.
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Pour chaque pH étudié, procéder de la même façon
: verser 3 mL du mélange substrats-tampon dans une cuvette standard
et placer la cuvette dans le colorimètre. Prélever 0.5 mL
du mélange enzyme-tampon de même pH et l’injecter dans la
cuvette à travers le couvercle. Enregistrer pendant 3 minutes et
sauver le fichier avec un nom explicite.
Calculer la vitesse initiale obtenue pour chaque mesure et construire
le graphique Vi = f (pH)
Voir des résultats
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