FICHE TECHNIQUE

CINETIQUE ENZYMATIQUE EN FONCTION DU pH


  1. Verser 1 mL de la solution d’enzyme dans 6 tubes à hémolyse numérotés de 1 à 6.
  2. Verser 3 mL de la solution de substrats (gaïacol et peroxyde d’hydrogène) dans 6 autres tubes numérotés.
  3. Verser dans chaque tube d’enzyme 1 mL de tampon (pH 2, 4, 6, 8, 10, 12) et 3 mL de tampon (pH 2, 4, 6, 8, 10, 12) dans les tubes contenant les substrats. Laisser incuber 10 minutes.
  4. Pour chaque pH étudié, procéder de la même façon : verser 3 mL du mélange substrats-tampon dans une cuvette standard et placer la cuvette dans le colorimètre. Prélever 0.5 mL du mélange enzyme-tampon de même pH et l’injecter dans la cuvette à travers le couvercle. Enregistrer pendant 3 minutes et sauver le fichier avec un nom explicite.
  5. Calculer la vitesse initiale obtenue pour chaque mesure et construire le graphique Vi = f (pH)

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