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TECHNIQUE
CINETIQUE ENZYMATIQUE EN FONCTION
DE LA CONCENTRATION EN INHIBITEUR
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Réaliser des dilutions de la solution d’inhibiteur (cyanure de potassium
à 50 µmol.L-1) en plaçant dans 6 tubes numérotés
les volumes suivants de la solution d’inhibiteur et en complétant
le volume à 2 mL avec du tampon :
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2 mL, 1.5 mL, 1 mL, 0.5 mL, 0.1 mL, 0 mL.
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Pour chaque dilution étudiée, procéder de la même
façon :
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verser 2 mL de la solution de substrats (gaïacol et peroxyde d'hydrogène)
dans une cuvette standard et ajouter 1 mL de la solution d’inhibiteur.
Placer la cuvette dans le colorimètre.
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Prélever 0.5 mL de la solution d’enzyme et l’injecter dans la cuvette
à travers le couvercle.
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Enregistrer pendant 3 minutes et sauver le fichier avec un nom explicite.
Calculer la vitesse initiale obtenue pour chaque mesure et construire le
graphique Vi = f (concentration en inhibiteur)
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