FICHE TECHNIQUE

CINETIQUE ENZYMATIQUE EN FONCTION DE LA CONCENTRATION EN ENZYME


  1. Réaliser des dilutions de la solution d’enzyme en plaçant dans 6 tubes numérotés les volumes suivants de la solution d’enzyme et en complétant le volume à 1 mL avec du tampon : 1 mL, 0.75 mL, 0.5 mL, 250 µL, 100 µL, 50 µL.
  2. Verser 3 mL de la solution de substrats (gaïacol et peroxyde d’hydrogène) dans 6 autres tubes numérotés.
  3. Pour chaque dilution étudiée, procéder de la même façon : verser 3 mL de la solution de substrats dans une cuvette standard et placer la cuvette dans le colorimètre. Prélever 0.5 mL de la solution d’enzyme et l’injecter dans la cuvette à travers le couvercle. Enregistrer pendant 1 minute et sauver le fichier avec un nom explicite.

    4.  

     

    Calculer la vitesse initiale obtenue pour chaque mesure et construire le graphique Vi = f (concentration en enzyme).